DIN EN 16956-2017 Kosmetische Mittel – Untersuchungsverfahren – HPLC/UV-Verfahren fir die ldentifizierung und Bestimmung von Hydrochinon, Hydrochinonethern und Kortikosteroiden in hautaufhellenden kosmetischen Mitteln; Deutsche Fassung EN 16956:2017.
Diese Europaische Norm legt em HPLC/UV-Verfahren (Hochleistungsflussigchromatographie mit tJVDetektion. en: high performance liquid chromatography with IJV detection) zur Identiflzierung und
Quantitlzierung von Hydrochinon, drei Hydrochinonethern und vier Kortikosteroiden fest, die am hautigsten
in entgegen den Vorschriften verkauften kosmetischen Mittein zur Hautaufhellung vorgefunden werden:
Clohetasoipropionat, lietamethasondipropionat, Fluocinonid und Fluocinolonacetonid.
Diese Norm enthält auerdcrn HPLC/UV-Verfahren zur Identifizierung von 38 Kortikosteroiden, die in Hautaufhellungsprodukten vorkommen können (siehe Anhang D).
Diese Norm 1st nicht fur kunstliche NagelprodLlkte oder Seifen vorgesehen.
2 Kurzbeschreibung
Die Probe wird mit einem Wasser/Methanol-Gemisch extrahiert und vorsichtig erwärmt, tim die im Produkt
vorhandenen Verhindungen herauszulösen. Das erhaltene Gemisch wird flltriert. Die quantitative
Bestimmung der in der Losung vorliegenden Verbindungen erfolgt durch Urnkehrphasen-H PLC mit
DAD-Nachweis (Diodenarray-Detektor, en: Diode Array Detector).
3 Reagenzien
Sofern nicht anders festgelegt, müssen analysenreine Reagenzien verwendet werden; das Wasser muss destifliert oder von entsprechender Reinheit sein. tinter einer ,.Losung” 1st, sofern nicht anders festgelegt, eine wässrige Losung zu verstehen.
3.1 Methanol, HPLC-Qualitat.
3.2 Wasser, HPLC-Qualität.
3.3 Extraktionslosung, Methanol/Wasser (1/1).
500 ml Methanol (3.1) und 500 ml Wasser (3.2) werden in einem 1 000-ml-Erlenmeyerkolben gemischt.
3.4 Berucksichtigte Verbindungen, siehe Tabelle 1.
3.5 Mobile Phase für die HPLC, mobile Phase A: Methanol (3.1); mobile Phase B: Wasser (3.2).
3.6 Referenzlosungen.
Für die Herstellung von Stammiosungen wird als LOsemittel Methanol (3.1) verwendet. Standardlosungen werden durch Verdünnen in einer Methanol/Wasser-LOsung (3.3) hergestellt.
3.6.1 Standard-Stammlösung von Hydrochinon und dessen drel Ethern (zwischen 1.2 mg/mI und
2,4 mg/mI).
In einen 25-ml-Messkolben eingewogen werden etwa:
0,03 g Hydrochinon;
0,04 g Hydrochi nonmonomethylether;
— 0,05 g Hydrochinonmonoethylether;
— 0,06 g Hydrochinonmonobenzylether.
Zunachst wird in 15 ml Methanol (3.1) gelost. gegebenenfalls mithilfe eines Schuttelgerats, und dann wird bis zur Kalibriermarke mit Methanol aufgefullt. Diese Losung muss täglich frisch hergestelit werden.
3.6.2 Standard-Stammlosungen (1 mg/mI) und Standard-Arheitslosung von vier der am häufigsten vorgefundenen Kortikosteroide (10 pg/mI).
In elnen 10-mI-Messkolben eingewogen werden separat etwa:
— 10 mg Betarnethasondipropionat; 10 mg Clobetasolpropionat;
— 10 mg Fluocinonid; 10 mg Fluocinolonacetonid.DIN EN 16956 pdf download.